Informasi

Perbedaan antara PCR untuk template linier dan plasmid?

Perbedaan antara PCR untuk template linier dan plasmid?



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Saya percaya PCR dapat dilakukan baik pada templat linier dan plasmid, dan saya bertanya-tanya bagaimana prosedur ini berbeda dalam enzim apa yang digunakan, bagaimana enzim bekerja pada templat, primer yang digunakan, dll.


Tidak ada banyak perbedaan di antara mereka. Enzim dan kondisi yang sama dapat digunakan apakah templat itu melingkar atau linier.

Anda dapat mengamplifikasi plasmid, tetapi PCR secara intrinsik menghasilkan fragmen DNA linier bahkan jika Anda menggunakan DNA sirkular.


Perbedaan antara PCR untuk template linier dan plasmid? - Biologi

Teknologi DNA rekombinan
Bab 7, hal. 146-148
Bab 14, hal. 252-257
Bab 34, Sistem Endokrin, Diabetes Mellitus, hal 615

Anda memiliki akses terbuka (tidak perlu login atau kata sandi) ke materi instruksional di situs web Teks. Pilih "Sumber Daya" dari kiri atas halaman dan pilih bab teks yang Anda inginkan.

Suasana hati

Anda juga dapat mengajukan pertanyaan dan melihat jawaban atas pertanyaan teman sekelas Anda di Moodle di forum "Talk to Ed".

Tujuan

Isi kuliah hari ini akan membantu Anda menjawab pertanyaan #2 pada tugas ini:

Setelah mempelajari materi ini Anda diharapkan dapat:

Gambarlah diagram atau tulis deskripsi kerja enzim restriksi dalam pemotongan molekul DNA menjadi “fragmen restriksi”.

Buat garis besar prosedur untuk mengisolasi gen tertentu dari organisme eukariotik, menggabungkannya ke dalam plasmid rekombinan, dan memasukkannya ke dalam sel bakteri untuk menghasilkan produk gen.

DNA donor enzim restriksi
situs pembatasan ujung lengket
plasmid DNA rekombinan
ligase vektor
Promotor

Jelaskan dan berikan contoh organisme transgenik

Jelaskan bagaimana reaksi berantai polimerase (PCR) digunakan untuk membuat jutaan salinan urutan DNA tertentu. Diskusikan pentingnya PCR di lokasi sekuens DNA spesifik dalam sampel kecil jaringan.

Sumber daya web:

Ini adalah kemungkinan lain untuk kredit tambahan. Tonton seluruh program dan tulis sebagai proyek kredit ekstra "Media Watcher".

Pilih "Teknik" di bagian bawah layar

Pilih "Memotong dan menempel" di bagian atas layar berikutnya

Dua animasi, "Cutting and paste DNA" dan "Recombining DNA" sangat berguna.

Pilih "Teknik" di bagian bawah layar berikutnya

Pilih "Memperkuat" di bagian atas layar berikutnya

Dua animasi, "Membuat banyak salinan DNA" dan "animasi PCR" sangat berguna.

Teknologi DNA rekombinan

Teknologi DNA rekombinan mengacu pada teknik molekuler yang digunakan untuk menyisipkan DNA (gen) dari satu jenis organisme ke organisme lainnya. Misalnya, manusia gen untuk produksi insulin dapat dimasukkan ke dalam DNA sel bakteri. Sel bakteri kemudian akan membelah untuk menghasilkan banyak sel bakteri baru, masing-masing dengan gen untuk manusia insulin dengan setia direplikasi. Bakteri kemudian menghasilkan manusia insulin yang dapat dipanen dan digunakan untuk mengobati penderita diabetes.

Bakteri memiliki satu kromosom melingkar besar dan beberapa potongan DNA melingkar kecil yang disebut plasmid.

Plasmid secara alami ditransfer dari satu sel bakteri ke sel bakteri lainnya. Ini adalah salah satu cara bakteri dapat berbagi informasi genetik dalam bentuk seks primitif.

Gen asing dapat secara artifisial ditambahkan ke plasmid dan ditempatkan ke dalam bakteri.

Enzim restriksi yang memotong DNA pada urutan basa yang sangat spesifik digunakan untuk memotong plasmid bakteri yang terbuka dan gen yang akan ditransfer meninggalkan komplementer.ujung lengketDNA yang memungkinkan DNA plasmid dan DNA asing saling menempel menggunakan enzim yang disebut ligase.

Lihat Teks Hoefnagels Bab 12 - Organisme Transgenik, hal 252-254

Pilih "Teknik" di bagian bawah layar

Pilih "Memotong dan menempel" di bagian atas layar berikutnya

Dua animasi, "Cutting and paste DNA" dan "Recombining DNA" sangat berguna.

Organisme Transgenik, alias Organisme yang Dimodifikasi Secara Genetik.

transgenik adalah kata yang digunakan untuk menggambarkan organisme yang membawa gen (DNA) organisme lain. Plasmid bakteri rekombinan adalah salah satu contohnya, tetapi istilah ini cukup luas untuk mencakup tanaman dan hewan yang membawa gen yang disisipkan secara artifisial dari organisme lain dengan berbagai metode.

Promotor - Transgen - Gen Penanda - Urutan Pengakhiran

Promotor - Ini adalah tombol on/off yang mengaktifkan gen dalam sel organisme transgenik.

transgen - Ini adalah gen yang sedang ditransfer dari satu organisme ke organisme lain.

Gen Penanda yang Dapat Dipilih - Gen ini menunjukkan bahwa konstruk transgen hadir dan aktif dalam sel oraninisme tansgenik. Gen penanda dapat memberikan perlindungan dari antibiotik atau racun yang memungkinkan peneliti untuk membunuh sel yang tidak membawa dan mengekspresikan transgen dan mempertahankan yang membawa. Terkadang gen penanda menyebabkan perubahan warna yang terlihat pada sel yang mengekspresikan konstruksi transgen.

Urutan Pemutusan - Urutan gen ini menandai akhir dari gen di mana produksi mRNA (Transkripsi) harus berhenti.

Reaksi Rantai Polimerase (PCR)

Reaksi Rantai polimerase adalah teknik bioteknologi yang digunakan untuk mereplikasi atau "menguatkan" bagian yang sangat spesifik dari sampel DNA yang jauh lebih besar. Tekniknya mirip dengan menggunakan mesin pencari seperti Google untuk menemukan dokumen tertentu di web dan kemudian mencetak banyak salinan.

Cobalah latihan ini dan lihat apa yang terjadi. Gunakan Google.com untuk melakukan pencarian lanjutan di web untuk frasa yang tepat ini, "Anda harus mempelajari konsep biologis yang akan membantu Anda membuat keputusan yang tepat di pasar, bilik suara, kantor dokter Anda, atau rapat dewan sekolah. "

Apa yang muncul? Google menemukan bahwa satu dokumen dari jutaan dokumen di web hanya menggunakan 28 kata.

Mirip dengan frasa yang Anda gunakan di Google.com, primer DNA untai tunggal yang digunakan dalam reaksi berantai polimerase dapat menemukan satu bagian DNA komplementer tertentu atau gen spesifik di antara semua DNA dari 23 pasang kromosom dan DNA mitokondria dalam sampel DNA dari seseorang. Teknik ini menggunakan primer DNA yang dibangun di laboratorium yang cocok dengan urutan DNA tertentu yang diketahui mendahului dan mengikuti bagian DNA yang ingin diperkuat.

Ketika DNA sedang direplikasi, primer buatan manusia yang terbuat dari DNA untai tunggal menyediakan titik awal untuk DNA polimerase (dalam hal ini Taq polimerase). Situasi analog adalah persyaratan faktor transkripsi untuk menyediakan tempat awal untuk RNA polimerase dalam transkripsi.

Setelah primer menemukan bagian DNA enzim Taq polimerase, enzim replikasi DNA dari termus akuatikus, bakteri yang hidup di sumber air panas yang mendidih di Taman Nasional Yellowsone, menggunakan nukleotida DNA yang dipasok oleh para peneliti untuk menghasilkan miliaran salinan bagian DNA itu dalam hitungan beberapa jam.
chemistrydaily.com

Animasi Reaksi Berantai Polimerase dari sumanasinc.com.
Pilih "Reaksi Berantai Polimerase (PCR)".
Tonton saja animasinya untuk mendapatkan "inti" konsep PCR.

Pilih "Teknik" di bagian bawah layar berikutnya

Pilih "Memperkuat" di bagian atas layar berikutnya

Dua animasi, "Membuat banyak salinan DNA" dan "animasi PCR" sangat berguna.

PCR digunakan untuk mengamplifikasi DNA untuk beberapa tujuan:

DNA dari sampel kecil darah, jaringan, atau cairan tubuh dapat diperkuat untuk dianalisis dalam kasus kriminal.

DNA mitokondria dari fragmen tulang dan gigi dapat digunakan untuk mengidentifikasi hubungan orang yang meninggal dengan kerabat atau kelompok etnis yang masih hidup.

DNA nuklir dari para korban serangan 11 September di World Trade Center dibandingkan dengan sampel DNA dari kerabat yang masih hidup atau sampel rambut atau jaringan lain yang dipasok oleh keluarga orang hilang.

Primer PCR yang cocok dengan DNA spesies organisme atau virus tertentu dapat digunakan untuk mengidentifikasi keberadaan organisme atau virus. Tes tersebut digunakan untuk menguji keberadaan HIV dalam sampel darah atau spora Anthrax pada peralatan pos.


Apa itu Isolasi DNA Genom

Isolasi DNA genom adalah prosedur ekstraksi DNA genom dari sel. Salah satu fitur utama dari isolasi DNA genom adalah membutuhkan langkah lisis yang kuat untuk melepaskan DNA genom ke dalam larutan. Umumnya, dinding sel dapat dipecah secara enzimatik oleh lisozim dan proteinase K. Sebaliknya, pemecahan mekanis dinding sel adalah proses yang lebih universal yang dilakukan dengan pemukulan manik-manik pada pusaran. Setelah lisis sel, pemurnian DNA baik dengan ekstraksi fenol-kloroform atau metode lain sangat penting untuk membersihkan bilayer lipid, protein, dan puing-puing sel lainnya.

Gambar 1: Isolasi DNA genom

Selanjutnya, degradasi DNA genom adalah salah satu kelemahan utama yang terjadi selama isolasi DNA genom. Oleh karena itu, penting untuk menjaga suhu rendah atau menggunakan inhibitor kimia untuk mencegah aktivitas DNase sekaligus mencegah kerusakan kromosom selama ekstraksi.


Pengaturan PCR

Menyiapkan reaksi PCR koloni hampir identik dengan menyiapkan reaksi PCR standar: gabungkan template, primer, polimerase, dan dNTP dan kemudian inkubasi dengan program thermocycling PCR standar. Salah satu perbedaan utama adalah DNA plasmid harus dilepaskan dari bakteri agar dapat berfungsi sebagai template PCR. Berurusan dengan ini dan beberapa tip PCR koloni lainnya disorot di bawah ini.

Menyiapkan template: Pilih satu koloni dengan tusuk gigi datar atau ujung pipet steril dan aduk dengan sedikit air steril. Pilih total 3-10 koloni untuk diuji, tergantung pada jumlah koloni latar belakang pada pelat kontrol tanpa ligasi Anda. Semakin banyak latar belakang, semakin banyak koloni yang perlu Anda saring.

Menyimpan klon untuk budaya selanjutnya: Pada titik ini, Anda ingin mempertahankan klon Anda untuk digunakan nanti. Ada beberapa cara yang bisa Anda lakukan. Jika Anda akan menyelesaikan analisis PCR koloni Anda pada hari yang sama, Anda dapat menyimpan sisa suspensi bakteri-air dan menggunakannya untuk memulai kultur klon positif Anda. Jika Anda ingin menyimpan klon Anda dalam jangka waktu yang lebih lama, cukup coret koloni di piring LB. Anda dapat menggunakan pelat ini untuk memulai kultur cair. Terakhir, Anda dapat memulai kultur cair kecil semalaman dengan klon yang Anda pilih dan hanya menyiapkan mini yang positif. Terlepas dari metode mana yang Anda pilih, pastikan untuk menggunakan antibiotik yang sesuai untuk pemilihan.

Melisiskan bakteri dan mengatur reaksi PCR: Suspensi bakteri-air yang tersisa akan berfungsi sebagai cetakan untuk reaksi PCR Anda. Anda hanya perlu melisiskan bakteri untuk melepaskan DNA plasmid dengan merebus sampel sebentar sebelum digunakan atau dengan langsung menambahkan sejumlah kecil sampel ke dalam reaksi PCR. Bakteri akan dilisiskan selama langkah pemanasan awal reaksi PCR. Taq polimerase standar sudah cukup.

Kontrol: Kontrol dapat membuat atau menghancurkan eksperimen. Kontrol terbaik untuk PCR koloni adalah kontrol yang sama yang digunakan untuk memverifikasi apakah primer PCR koloni bekerja di tempat pertama: vektor tulang punggung dengan dan tanpa sisipan. Kontrol ini adalah referensi cepat yang dapat Anda gunakan saat menjalankan produk PCR pada gel untuk menentukan apakah koloni mengandung sisipan. Mereka juga berfungsi sebagai kontrol untuk reaksi PCR Anda. Menjalankan reaksi PCR tanpa template control untuk mendeteksi kontaminasi juga merupakan ide yang bagus.


Tentang DNA plasmid dan elektroforesis gel:

DNA plasmid dapat eksis dalam tiga konformasi: superkoil, lingkaran terbuka (oc), dan linier (DNA plasmid superkoil sering disebut sebagai DNA sirkular tertutup kovalen, cc).
Dalam hidup, DNA plasmid adalah lingkaran superkoil yang rapat untuk memungkinkannya masuk ke dalam sel. Di laboratorium, setelah persiapan plasmid yang cermat, sebagian besar DNA akan tetap superkoil, tetapi sejumlah tertentu akan mempertahankan torehan untai tunggal. Mengingat adanya pemutusan hanya pada salah satu untai, DNA akan tetap melingkar, tetapi pemutusan akan memungkinkan rotasi di sekitar tulang punggung fosfodiester dan superkoil akan dilepaskan.
Simpul ccc-DNA kecil yang kompak dan superkoil menopang lebih sedikit gesekan terhadap matriks agarosa daripada lingkaran terbuka floppy besar dari oc-DNA. Oleh karena itu, untuk ukuran keseluruhan yang sama, DNA superkoil berjalan lebih cepat daripada DNA sirkular terbuka. DNA linier berjalan melalui ujung gel terlebih dahulu dan dengan demikian menopang lebih sedikit gesekan daripada DNA sirkular terbuka, tetapi lebih dari superkoil. Dengan demikian, plasmid yang tidak dipotong menghasilkan dua pita pada gel, yang mewakili konformasi oc dan ccc. Namun, jika plasmid dipotong sekali dengan enzim restriksi, konformasi superkoil dan lingkaran terbuka semuanya direduksi menjadi konformasi linier.
Setelah isolasi, torehan spontan terakumulasi sebagai persiapan plasmid. Hal ini dapat dilihat dengan jelas pada gel sebagai proporsi dari dua konformasi berubah dari waktu ke waktu: preparat plasmid yang telah dicairkan dan dibekukan berkali-kali, menunjukkan lebih banyak oc DNA daripada preparat segar.

Ini adalah foto hitam-putih gel agarosa yang mengandung etidium bromida, setelah elektroforesis tiga sampel DNA. Gel berada di lampu UV saat difoto. Itu oranye lemah sedangkan pita DNA memiliki warna oranye terang karena pengikatan spesifik EthBr ke molekul DNA.
Migrasinya dari atas ke bawah: anoda (+) berada di sisi bawah gel ini, katoda (-) di bagian atas. Molekul DNA yang lebih kecil bermigrasi lebih cepat daripada yang besar. Pita berbeda dalam intensitasnya: fragmen yang lebih besar mengikat lebih banyak EthBr. Ini sangat bagus terlihat di ukuran penanda jalur 1. Semua fragmen di jalur ini dihasilkan oleh pencernaan satu DNA tertentu, jadi fragmen ada di jumlah equimolar dan kecerahan pita sesuai dengan panjangnya (yang terkenal).
Jelas bahwa di jalur 2 dua fragmen hadir dalam jumlah yang tidak sama (pita atas harus mengandung molekul DNA yang lebih panjang, tetapi kurang intens daripada pita bawah..). Dalam kasus khusus ini karena mereka mewakili dua bentuk melingkar dari DNA plasmid yang sama (oc di atas, dan ccc di bawah). Rasio jumlah DNA pada kedua pita tergantung pada umur dan kualitas preparasi plasmid.

Lihat juga SCLResources>Lambda DNA untuk informasi tentang pola pita gel dari intisari DNA Lambda.


Perbedaan antara PCR untuk template linier dan plasmid? - Biologi

Pedoman untuk validasi internal dan antar laboratorium metode qPCR kualitatif.

Penerimaan metode dan parameter kinerja yang akan dievaluasi.

Kriteria penerimaan yang harus dipenuhi untuk parameter tersebut di atas.

Pengaturan eksperimental terperinci untuk validasi internal dan antar-laboratorium.

Untuk banyak bidang pengujian molekuler, deteksi Genetically Modified Organisms (GMO) bergantung pada teknologi Polymerase Chain Reaction (qPCR) real-time. Karena meningkatnya jumlah transgenik, pendekatan skrining menggunakan metode skrining kualitatif telah menjadi bagian terintegrasi dari deteksi transgenik. Namun, pedoman khusus untuk validasi metode ini masih kurang. Di sini, pendekatan pragmatis untuk melakukan studi validasi internal dan antar laboratorium untuk metode skrining transgenik, diusulkan. Pedoman tersebut dapat disesuaikan dengan area lain di mana metode qPCR kualitatif digunakan untuk pengujian molekuler yang memungkinkan penerapan fase penyaringan yang lebih andal dengan mudah jika diperlukan.


TEKNIK DIAGNOSTIK | Deteksi Antigen Virus, Asam Nukleat dan Antibodi Spesifik

Metode berbasis transkripsi NASBA, 3SR dan TMA sangat mirip. NASBA adalah proses isotermal yang berkelanjutan, yang dapat mengamplifikasi RNA (Gbr. 2). RNA target pertama kali diubah menjadi cDNA oleh RT menggunakan primer spesifik virus, yang mengandung urutan promotor yang dikenali oleh T7 RNA polimerase (P1). Setelah pemindahan RNA dari hibrid DNA:RNA oleh RNase H dan sintesis untai DNA komplementer dengan primer spesifik virus kedua (P2), sekitar 1000 salinan RNA dari cetakan DNA ditranskripsi dengan inkubasi dengan T7 RNA polimerase. Setiap salinan RNA sekarang berfungsi lagi sebagai template untuk putaran baru amplifikasi. 3SR berbeda dari NASBA karena kedua primer mengandung sekuens promotor T7. Dalam TMA, hanya RT dan RNA polimerase yang digunakan. Metode ini semakin banyak digunakan, terutama dalam sistem komersial lengkap.

Gambar 2 . NASBA. RT, reverse transcriptase P1, primer antisense P2, primer antisense pol, polimerase (+), sense atau coding strand (−) antisense atau noncoding strand bold lines, primer light lines, DNA wavy lines, RNA dotted line, complete DNA strand.


Keterangan

Skema

  • Plasmid merah adalah vektor konstruksi.
    • Ini berisi ccdB seperti yang ditunjukkan oleh panah blok hitam. Warna merahnya menunjukkan bahwa ia memiliki penanda resistensi antibiotik yang berbeda dari masing-masing dua bagian (biru dan hijau).
    • Sebenarnya, itu hanya perlu berisi situs pembatasan EcoRI dan PstI seperti yang ditunjukkan, bukan awalan dan akhiran BioBricks lengkap Namun, untuk kenyamanan, semua plasmid konstruksi yang dibuat hingga saat ini memiliki awalan dan akhiran BioBricks lengkap.
    • Perhatikan bahwa bagian akhiran dapat memiliki penanda resistensi antibiotik yang sama atau berbeda dari bagian awalan. Oleh karena itu kemungkinan untuk memiliki 2 atau 3 penanda resistensi antibiotik yang berbeda.

    Gambaran

    Plasmid konstruksi dipotong dengan EcoRI (E) dan PstI (P). Bagian awalan dipotong dengan EcoRI (E) dan SpeI (S). Bagian akhiran dipotong dengan XbaI (X) dan PstI (P). Potongan DNA linier yang dihasilkan kemudian diikat bersama dan ditransformasikan. Sel-sel yang ditransformasi dilapiskan pada pelat yang dilengkapi dengan antibiotik yang sesuai dengan plasmid merah.

    Analisis

    • Karena sel-sel yang ditransformasi dilapiskan pada pelat yang dilengkapi dengan antibiotik yang sesuai dengan plasmid konstruksi, hanya sel-sel yang mengandung tulang punggung plasmid merah (konstruksi) yang harus bertahan.
    • Karena plasmid konstruksi mengandung ccdB, sel-sel yang ditransformasi hanya dengan plasmid konstruksi utuh harus dibunuh oleh gen ccdB yang mematikan.

    Hasil  

    Percepat Colony PCR dengan SapphireAmp Fast PCR Master Mix

    SapphireAmp Fast PCR Master Mix cepat&mdash dengan kecepatan ekstensi 10 detik/kb, reaksi dapat diselesaikan dalam setengah waktu konvensional Tak. Campuran master SapphireAmp juga jauh lebih cepat daripada campuran pewarna tambahan yang ditawarkan oleh produsen lain. Tabel di bawah ini mencantumkan waktu reaksi untuk campuran master SapphireAmp dan waktu reaksi yang disarankan untuk dua campuran tambahan pewarna yang tersedia secara komersial.

    Panjang amplikonCampuran Master PCR Cepat SapphireAmpCampuran master yang ditambahkan pewarna P PerusahaanCampuran master yang ditambahkan pewarna T perusahaan
    0,5 kb 50 menit 1 jam 35 menit 1 jam 30 menit
    1.0 kb 55 menit 1 jam 50 menit 1 jam 45 menit
    2.0 kb 1 jam 2 jam 20 menit 2 jam 15 menit
    4.0 kb 1 jam 30 menit 3 jam 20 menit 3 jam 15 menit

    Contoh eksperimental: Menggunakan SapphireAmp Fast PCR Master Mix untuk menyaring pustaka cDNA dengan PCR koloni

    E. coli sel ditransformasikan dengan perpustakaan cDNA tikus (ukuran sisipkan dari 0,5 hingga 5 kb) diikat ke pUC118. Transforman yang mengandung plasmid dianalisis menggunakan SapphireAmp Fast PCR Master Mix dan primer M4 dan RV (lihat Metode di bawah). Siklus reaksi PCR selesai hanya dalam 70 menit, dan hasil yang sangat baik diperoleh. Semua 16 klon yang diperiksa dipastikan mengandung sisipan 0,5 hingga 5 kb.

    Gambar 2. Koloni PCR dengan SapphireAmp Fast PCR Master Mix.


    Produk PCR dari plasmid tidak linier - (14 Februari 2008 )

    saya melakukan praktikum laboratorium di mana kami mengubah resistensi ampisilin menjadi E.coil menggunakan pUC19. sebagai bagian dari itu, kami menempatkan sampel linier dan sampel tidak linier sebagai templat ke dalam PCR, dan memuat produk bersama dengan intisari restriksi plasmid, dan seluruh plasmid yang tidak tercerna ke dalam gel agarosa untuk elektroforesis.

    mengapa plasmid yang tidak linier menghasilkan produk yang berbeda dari PCR?
    dan hasil gel saya telah membingungkan saya produk PCR plasmid linier saya dan produk plasmid sirkular telah menghasilkan hasil yang sama, cerna restriksi saya memiliki dua pita, dan jaraknya bermigrasi sama dengan plasmid utuh yang tidak tercerna, dan plasmid terlinierisasi memiliki dua pita yang sangat redup di tempat yang sama dengan intisari restriksi

    Pertama-tama, Anda mungkin ingin bertanya pada diri sendiri apa yang Anda harapkan untuk dilihat di setiap jalur pada gel Anda. Misalnya, seberapa besar DNA dari PCR Anda dibandingkan dengan ukuran plasmid induknya? Haruskah linear dan cut plasmid memberikan hasil yang sama pada PCR Anda atau tidak? Mengapa?

    Selanjutnya, apa perbedaan yang diharapkan antara plasmid 'uncut' Anda, plasmid 'linearis' Anda dan plasmid 'restriction digested' Anda? Berapa ukuran fragmen DNA yang Anda harapkan dari masing-masing? Juga, haruskah elektroforesis plasmid superkoil yang belum dipotong dengan cara yang sama seperti plasmid linier atau tidak?

    Saya yakin jika Anda memikirkannya dengan cermat, Anda dapat menjawab sendiri sebagian besar pertanyaan Anda.


    Tonton videonya: Perbedaan PCR-TCM-Test Antibodi-Test Serologi.. RS Sriwijaya (Agustus 2022).